تحديد محتوى حمض الأكساليك في الفواكه والخضراوات بواسطة كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC)
1. تصميم المبادئ والأساليب التجريبية
يُعد حمض الأكساليك من الأحماض العضوية الشائعة في الفواكه والخضراوات، ويؤثر محتواه بشكل مباشر على مذاق الطعام وقيمته الغذائية. تستخدم هذه التجربة تقنية كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء ذي الطور المعكوس (RP-HPLC). في ظل ظروف الطور المتحرك الحمضي، يُفصل حمض الأكساليك تمامًا عن المواد المتداخلة باستخدام عمود كروماتوغرافي C18. ويُستخدم كاشف للأشعة فوق البنفسجية مضبوط على 210 نانومتر للتحليل الكمي، استنادًا إلى خصائص امتصاص الأشعة فوق البنفسجية لمجموعات الكربوكسيل في جزيئات حمض الأكساليك.
2. منحنى المعايرة وإعداد العينة
تُستخدم طريقة التخفيف المتدرج لتحضير المحاليل القياسية: يُوزن بدقة 25.0 ملغ من ثنائي هيدرات حمض الأكساليك، ثم يُخفف إلى 25 مل باستخدام ماء فائق النقاء للحصول على محلول أساسي بتركيز 1 ملغ/مل. يُخفف هذا المحلول بالتتابع إلى سلسلة من المحاليل القياسية بتراكيز 50، 100، 200، 400، و800 ميكروغرام/مل، مع حقن كل تركيز ثلاث مرات.
لتحضير العينة، يتم استخدام الاستخلاص بمساعدة الميكروويف: وزن 5.00 غرام من متجانس الفاكهة / الخضار، إضافة 10 مل من محلول حمض الهيدروكلوريك 0.1 مول / لتر، المعالجة عند 60 درجة مئوية بالميكروويف لمدة 10 دقائق، الترشيح من خلال مرشح غشائي 0.45 ميكرومتر، وجمع الراشح للاختبار.
3. تحسين ظروف الفصل الكروماتوغرافي
تتكون المرحلة المتحركة من نظام أسيتونيتريل (95:5) ومحلول منظم من فوسفات ثنائي هيدروجين البوتاسيوم بتركيز 0.01 مول/لتر (الأس الهيدروجيني 2.5)، بمعدل تدفق 0.8 مل/دقيقة ودرجة حرارة عمود 35 درجة مئوية. أظهرت تعديلات نسبة الأسيتونيتريل أنه عندما تتجاوز نسبة الطور العضوي 10%، يقل زمن احتجاز حمض الأكساليك إلى أقل من 3 دقائق، مع ظهور ذيل للذروة. في ظل الظروف المُحسّنة النهائية، يبلغ زمن احتجاز حمض الأكساليك 4.2 دقيقة، مما يحقق فصلًا كاملًا عن حمض الستريك وحمض الماليك المجاورين (دقة الفصل > 1.5).
4. التحقق من صحة الطريقة
أظهر التحقق من النطاق الخطي وجود علاقة خطية جيدة بين مساحة الذروة والتركيز في نطاق 10-1000 ميكروغرام/مل (R² = 0.9993). بلغ حد الكشف (LOD)، المحدد بطريقة نسبة الإشارة إلى الضوضاء، 0.5 ميكروغرام/مل. في اختبارات التكرارية، بلغت نسبة الانحراف المعياري النسبي (RSD) لستة قياسات متكررة لنفس عينة السبانخ 1.8%. أظهرت تجارب استرداد المادة المضافة عند ثلاثة مستويات (80%، 100%، و120%) متوسط استرداد بلغ 98.2%، 102.4%، و97.8% على التوالي، ما يفي بمتطلبات التحليل الكمي.
5. تحليل العينات الحقيقية
تم اختبار ستة أنواع من الفواكه والخضراوات المتوفرة تجاريًا: السبانخ (356 ± 12 ملغم/100 غرام)، والكرفس (215 ± 9 ملغم/100 غرام)، والطماطم (18 ± 2 ملغم/100 غرام)، والتفاح (6 ± 1 ملغم/100 غرام)، والموز (لم يُكشف عنه)، والبروكلي (89 ± 5 ملغم/100 غرام). أظهرت المقارنة مع الطريقة القياسية الوطنية (GB 5009.277-2016) أن الانحراف النسبي بين الطريقتين أقل من 5%، مما يؤكد موثوقية هذه الطريقة. وعلى وجه الخصوص، تُظهر طريقة كروماتوغرافيا السائل عالي الأداء (HPLC) حساسية أعلى من طرق المعايرة التقليدية عند تحليل العينات ذات المحتوى المنخفض.
6. ملاحظات رئيسية
يجب التحكم بدقة في قيمة الرقم الهيدروجيني أثناء المعالجة المسبقة للعينة. إذا تجاوز الرقم الهيدروجيني للمستخلص 3، فسيؤدي ترسب أكسالات الكالسيوم إلى نتائج اختبار ضعيفة. ينبغي تحضير الطور المتحرك طازجًا يوميًا لتجنب ترسب الأملاح وانسداد العمود. بعد كل 20 حقنة، يُغسل العمود بمزيج من الأسيتونيتريل والماء (30:70) لمدة 30 دقيقة لمنع تدهور كفاءة العمود. بالنسبة للعينات المحتوية على أصباغ (مثل الملفوف الأرجواني)، يُوصى بإضافة خطوة تنقية باستخدام استخلاص الطور الصلب قبل الحقن.
7. تعليمات التطبيق والتوسع
يمكن توسيع نطاق هذه الطريقة لتشمل الكشف عن حمض الأكساليك في العينات البيولوجية كالبول والدم. ومن خلال تعديل تركيبة الطور المتحرك (مثلاً، بإضافة هيدروكسيد رباعي بوتيل الأمونيوم)، يُمكن تحديد حمض الأكساليك ومستقلباته في آنٍ واحد. وباستخدام كاشف مطياف الكتلة، يُمكن تطوير طريقة أكثر دقة للكشف عن الآثار. وفي صناعة تجهيز الأغذية، تُوفر هذه الطريقة بيانات هامة لدعم اختيار أصناف منخفضة حمض الأكساليك وتحسين عمليات الطهي.
شركة زيبو أنهاو للمواد الكيميائية المحدودة - حمض الأكساليك
شركة زيبو أنهاو للمواد الكيميائية المحدودة هي مورد ومصدر موثوق لحمض الأكساليك عالي الجودة (درجة صناعية، 99.6% كحد أدنى) من شاندونغ، الصين. حمض الأكساليك الذي نقدمه عبارة عن مادة صلبة بلورية بيضاء، تُعرف أيضًا باسم حمض الإيثانديويك، وصيغتها الجزيئية C₂H₂O₄. يتميز هذا الحمض بنقائه العالي، وانخفاض نسبة الشوائب فيه، وثبات جودته بين الدفعات، مما يلبي متطلبات صناعات النسيج، والجلود، والمعادن، ومعالجة العناصر الأرضية النادرة، والتنظيف الكيميائي، والبناء.
نُوفر حمض الأكساليك اللامائي وثنائي الهيدرات، متوفرًا في أكياس سعة 25 كجم، و50 كجم، وأكياس كبيرة سعة 1000 كجم. بفضل إجراءات مراقبة الجودة الصارمة، وتقارير الاختبار الشاملة، وخطط التوريد المرنة، نضمن تسليمًا مستقرًا وأداءً ثابتًا للمشترين في جميع أنحاء العالم. تُصدّر منتجاتنا على نطاق واسع إلى جنوب شرق آسيا، وأوروبا، وأفريقيا، والأمريكتين، وقد حظيت بسمعة طيبة لجودتها الموثوقة وأسعارها التنافسية.
اختر شركة زيبو أنهاو للمواد الكيميائية للحصول على إمدادات موثوقة من حمض الأكساليك وخدمة كيميائية احترافية شاملة.
اختر شركة زيبو أنهاو كيميكال للحصول على حمض الأكساليك عالي النقاء الذي يوفر أداءً مستقرًا وقيمة مضافة لأعمالك. تواصل معنا لطلبات الجملة أو المواصفات الفنية: info@anhaochemical.com
